DiD 高氯酸鹽 (細胞膜紅色熒光探針)

保存條件 Store at -20℃, protect from light.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色，這類染料在整個細胞膜上擴散，最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯：DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長，在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織，在活體成像中用來示蹤。

DiD perchlorate

CAS號：127274-91-3

純度：＞95%

Ex/Em: 644/663nm 推薦濾光器（Filter）: XF47-Omega, 31023-Chroma

儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

溶解性：可溶于無水乙醇、DMSO和DMF，其中在DMSO中溶解度大于10mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱，并用超聲處理以促進溶解。

DiD 高氯酸鹽 (細胞膜紅色熒光探針)

使用方法

1. DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備

（1）配置DMSO或EtOH 儲存液：儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。

注意：未使用的儲存液保存在-20 oC，避免反復凍融。

（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5 µM的工作液。

注意：工作液的最終濃度是根據(jù)不同細胞和實驗的經驗來配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找最佳條件。

2. 懸浮細胞染色

（1）懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。

（2）在37 ℃培養(yǎng)細胞 2～20分鐘，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同。

（3）染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鐘。

（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養(yǎng)液。

（5）重復（3），（4）步驟兩次以上。

3. 粘壁細胞的染色

（1）使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yǎng)。

（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

（3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

（4）在37 ℃培養(yǎng)細胞 2～20分鐘，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同。

（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。

4. 顯微鏡檢測

（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。

（2）多色染料的同時檢測，濾光器按照以下設定：

a） DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b） DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c） DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005

5. 流式細胞儀的檢測

DiD，DiO，DiI，DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經典的FL1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3和FL4流式細胞儀檢測。

關于我們

Bioss（博奧森）于2001年在北京成立，是一家擁有自主品牌，集免疫學科研試劑研發(fā)、生產、銷售為一體的國家高新技術企業(yè)。自成立之初，公司始終秉持“自主研發(fā)、原始創(chuàng)新"的經營理念，為生命科學研究提供高質量的科研抗體，診斷抗體原料，免疫學輔助試劑，以及CRO服務。

Bioss Inc.于2010年在美國波士頓設立了面向全球抗體市場的商務拓展及國際市場營銷總部，不斷擴展全球銷售體系，主打Bioss國際品牌，向全球科研工作者提供高質量的科研抗體產品。迄今為止，Bioss產品已遍布全球多個國家和地區(qū)，并已成為數(shù)家歐美抗體公司的OEM合作伙伴。

二十年的探索和拼搏，為Bioss品牌在免疫學試劑領域奠定了堅實的基礎。我們在美國、中國、德國、日本分別建有現(xiàn)貨庫存，為生命科學研究提供更及時的服務。

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Bioss公司自成立以來就非常重視抗體的驗證，建立了嚴格的抗體生產、質檢質控體系，并密切關注生物醫(yī)學的前沿研究。2016年Bioss 啟動了Knock Out（敲除）技術驗證。不斷開發(fā)和提供特異性及性價比的研究工具，以滿足研究人員的需求。

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